豬ELISA檢測(cè)試劑盒基本原理與蔗糖封閉原理分析

發(fā)布時(shí)間：2021-04-25 點(diǎn)擊次數(shù)：1464次

　　豬ELISA檢測(cè)試劑盒基本原理：

　　①抗原或抗體能吸附到固相載體表面，并保持其免疫學(xué)活性；

　?、诳乖蚩贵w可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，仍保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；

　　③酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。

　　豬ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點(diǎn)，蔗糖封閉的原理：

　　1、實(shí)驗(yàn)中，蔗糖本身沒(méi)有封閉作用;

　　2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。

　　3、加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護(hù)劑"的作用。

　　4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過(guò)BSA封閉后加，當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時(shí)進(jìn)行處理;那一種更好需要你實(shí)驗(yàn)后來(lái)驗(yàn)證。但多數(shù)選擇前者。

　　封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可)，0.4%的明膠，但是實(shí)驗(yàn)表明前者比較好，后者不容易洗干凈未結(jié)合上的明膠。

　　封閉劑的原理就是與酶聯(lián)板上未結(jié)合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上，結(jié)合抗體或抗原的時(shí)候就不會(huì)產(chǎn)生非特異結(jié)合了，不會(huì)影響。

　　tween的作用：雖然不能單獨(dú)封閉，但和BSA在封閉時(shí)會(huì)起到清洗非特異性結(jié)合或結(jié)合不牢固的蛋白的作用，假如抗體包被在板上會(huì)出現(xiàn)YY-

　　豬ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實(shí)驗(yàn)，把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢?br />

　　(1) ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液；

　　(2) ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液；

　　(3) ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液;