兔elisa檢測試劑盒運用雙抗體夾心ELISA法定量測定兔血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中兔ELISA試劑盒含量。
兔elisa檢測試劑盒基本原理:
1、抗原或抗體能吸附到固相載體表面,并保持其免疫學活性;
2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,仍保持其免疫學和酶學活性;
3、酶結(jié)合物與相應抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。
性能特點:
1、準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900;
2、靈敏度:最小檢測濃度小于;
3、特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應;
4、重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%;
5、貯藏:2-8℃,避光防潮保存;
6、有效期:6個月。
兔elisa檢測試劑盒液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2、血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3、尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4、細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5、組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。